原料乳中志贺氏菌的实时荧光环介导等温扩增技术研究

作     者：李月华 付博宇 马晓燕 张先舟 王羽 张伟 LI Yue-hua;FU Bo-yu;MA Xiao-yan;ZHANG Xian-zhou;WANG Yu;ZHANG Wei

作者机构：河北农业大学食品科技学院保定071000 河北省食品检验研究院河北省食品安全重点实验室石家庄050071 

基　　金：国家自然科学基金项目(C2008000216) 

出 版 物：《食品科技》 (Food Science and Technology)

年 卷 期：2016年第41卷第1期

页      码：315-320页

摘      要：为了建立原料乳中志贺氏菌快速检测的有效方法,提高志贺氏菌的检出效率。研究根据Gen Bank中志贺氏菌侵袭性质粒抗原H基因(ipa H),设计特异性LAMP引物,将SYBR GreenⅠ荧光染料结合到LAMP扩增技术中,通过实时荧光监测仪优化Mg^(2+)、d NTPs、温度和引物等反应条件,建立了实时荧光环介导等温扩增技术检测志贺氏菌的反应体系,对纯菌的菌悬液及原料乳人工污染样品中的志贺氏菌进行检测,并对该检测方法的特异性、灵敏度进行了研究,并与普通的LAMP检测方法进行比较。结果表明,该检测方法特异性强灵敏度高,纯菌的菌悬液灵敏度和人工污染样品的检出限都能够达到100 cfu/m L,且灵敏度高于普通的LAMP检测方法。综上所述,研究建立的实时荧光LAMP检测方法灵敏度高、特异性强、耗时短,且检测结果直观易于分析,适用于快速准确监测原料乳中志贺氏菌的污染情况。

主 题 词：志贺氏菌 ipaH 实时荧光LAMP 原料乳 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 083203[083203] 

D　O　I：10.13684/j.cnki.spkj.2016.01.062

馆 藏 号：203720860...