猪细小病毒SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒的研制

作     者：余波 周思旋 谭诗文 徐景峨 史开志 杨莉 YU Bo;ZHOU Si-xuan;TAN Shi-wen;XU Jing-e;SHI Kai-zhi;YANG Li

作者机构：贵州省畜牧兽医研究所贵阳550005 

基　　金：贵州省农业攻关项目[黔科合NY字(2010)3085] 贵州省畜禽健康养殖技术创新能力建设项目[黔科合院所创能(2010)4004] 

出 版 物：《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期：2015年第54卷第1期

页      码：126-129,133页

摘      要：根据GenBank中猪细小病毒VP2基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得猪细小病毒VP2基因片段,并克隆到p MD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化,建立了猪细小病毒的SYBR Green I荧光定量PCR诊断方法,以此为基础研制出试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对PRV、PCV-2、***、CSFV、PRRSV均无阳性信号扩增,可重复性好,测灵敏度可达1.0×101拷贝/μL。结果表明,研制的猪细小病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等优点,适合于猪细小病毒临床样品的检测。

主 题 词：猪细小病毒 VP2基因 SYBR Green I荧光定量 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.01.033

馆 藏 号：203725434...