牛腺病毒5型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：安微 陈世界 王史 张婧 杨苗 薛昌华 余姓鸿 林华 AN Wei;CHEN Shijie;WANG Shi;ZHANG Jing;YANG Miao;XUE Changhua;YU Xinghong;LIN Hua

作者机构：四川出入境检验检疫局检验检疫技术中心四川成都610041 海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心海南海口570100 

基　　金：四川出入境检验检疫局科技项目(SK201703) 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第51卷第8期

页      码：101-104页

摘      要：建立针对牛腺病毒5型六邻体(Hexon)基因的实时荧光定量TaqMan PCR检测方法。根据牛腺病毒5型Hexon基因高度保守区设计引物和TaqMan探针,绘制标准曲线,对其灵敏度、特异性、重复性进行验证,建立牛腺病毒5型实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法。结果显示,构建的重组质粒pUC57-BAV5,标准曲线在10~2~10~7拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.975 2,建立检测方法的最低检测限为32拷贝/μL;应用建立的方法检测牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒、牛呼吸道合胞体病毒无交叉反应;重复性试验表明,同一浓度的20个平行样品的变异系数为1.4%。牛腺病毒5型TaqMan探针荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可以用于牛腺病毒5型的快速、准确的检测。

主 题 词：牛腺病毒5型 Hexon基因 TaqMan探针 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203727334...