杉木ISSR—PCR反应体系的正交优化

作     者：安静 徐刚标 申响保 谷振军 张玉梅 储秀云 AN Jing;XU Gang-biao;SHEN Xiang-bao;GU Zhen-jun;ZHANG Yu-mei;CHU Xiu-yun

作者机构：中南林业科技大学生命科学与技术学院湖南长沙410004 

基　　金：国家自然科学基金项目(31070484) 

出 版 物：《中南林业科技大学学报》 (Journal of Central South University of Forestry & Technology)

年 卷 期：2011年第31卷第3期

页      码：156-159页

摘      要：利用正交设计实验对影响杉木ISSR-PCR扩增的重要因素（Mg^2＋、dNTP、模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶）进行优化,以建立杉木ISSR-PCR反应的最佳体系。结果发现杉木ISSR-PCR最佳反应体系（20μL）为：MgCl21.8 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.7μmol/L,模板DNA 90 ng,TaqDNA聚合酶1 U;退火温度为52-55℃。扩增反应程序为：94℃预变性5 min;94℃变性30 s,52℃退火40 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃延伸7 min;4℃保存。该反应体系的建立,为杉木种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法。

主 题 词：杉木 ISSR-PCR 正交优化 

学科分类：0907[农学-草药学] 08[工学] 0829[工学-安全科学与工程类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-923X.2011.03.032

馆 藏 号：203727678...