小鼠脂多糖应答蛋白LRP的大肠杆菌表达及其兔抗血清抗体的制备

作     者：代忠明 陈苏民 杜可军 陈南春 宋庆贺 骆文静 陈景元 DAI Zhong-ming;CHEN Su-min;DU Ke-jun;CHEN Nan-chun;SONG Qing-he;LUO Wen-jing;CHEN Jing-yuan

作者机构：第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 第四军医大学劳动卫生与环境卫生学教研室陕西西安710032 第四军医大学劳动卫生与环境卫生学教研室 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30400413) 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2006年第22卷第3期

页      码：371-373,376页

摘      要：目的原核表达小鼠脂多糖应答蛋白并制备兔抗mLRP抗血清。方法参考GenBank中已登录的人lrp-cDNA序列,对小鼠的同源表达序列标签(EST)序列进行拼接,预测mlrpcDNA序列。用设计的引物,进行RT-PCR,从脂多糖刺激的NIH3T3细胞中扩增mlrp的cDNA序列,克隆入pTAT载体中,构建mlrp的原核表达载体。以其转化在大肠杆菌中诱导表达后,将获得的His-TAT-mLRP融合蛋白免疫家兔,用丙酮沉淀全菌蛋白吸附法制备纯化的抗mLRP血清,用West-ernblot鉴定抗体的特异性。结果预测的mlrpcDNA的长度为1905bp。将克隆获得的1554bp大小的mlrp-cDNA编码区序列插入pTAT质粒中,在大肠杆菌中表达出His-TAT-mL-RP融合蛋白。以其免疫家兔,制备了特异性兔抗mLRP的血清。结论mlrp的原核表达及特异性兔抗mLRP血清的制备,为进一步研究mLRP的功能奠定了基础。

主 题 词：脂多糖应答蛋白 原核表达 多克隆抗体 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1007-8738.2006.03.030

馆 藏 号：203732158...