犬瘟热病毒RT-nested PCR检测方法的建立与应用

作     者：王凤雪 闫喜军 柴秀丽 罗国良 张海玲 邵西群 吴威 程世鹏 WANG Feng-xue;YAN Xi-jun;CHAI Xiu-li;LUO Guo-liang;ZHANG Hai-ling;SHAO Xi-qun;WU Wei;CHENG Shi-peng

作者机构：中国农业科学院特产研究所吉林吉林132109 

基　　金：科研院所社会公益研究专项(2005DIB4J048) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2007年第37卷第11期

页      码：955-959页

摘      要：根据犬瘟热病毒(CDV)弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计了套式引物,建立了RT-nested PCR检测方法。特异性试验表明,该法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬冠状病毒(CCV),DNA病毒犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)及正常Vero细胞中均不能扩增出条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增到10-9稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。用RT-nested PCR法检测了2006年我国东北地区临床表现犬瘟热症状的病例19例,检出率达90%,明显高于RT-PCR的检出率(45%)。部分病例扩增片段的测序结果表明,CDV NP基因出现个别碱基变异。研究结果表明,建立的犬瘟热病毒RT-nested PCR方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热的快速诊断。

主 题 词：犬瘟热病毒 反转录巢式PCR 反转录PCR NP基因 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-4696.2007.11.010

馆 藏 号：203732587...