结核分枝杆菌ACR蛋白的原核表达及纯化

作     者：曹旭东 陈创夫 CAO Xu-dong;CHEN Chuang-fu

作者机构：石河子大学医学院新疆石河子832002 石河子大学动物科技学院新疆石河子832002 

基　　金：国际科技合作项目基金(2006DFA33740) 石河子大学科研基金(ZRKX200726) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2009年第31卷第7期

页      码：528-531页

摘      要：为获得区别结核感染状态的血清学鉴别诊断试剂的抗原,根据GenBank中登录的结核杆菌H37Rv的ACR基因序列设计1对引物,以热灭活的结核杆菌H37Rv菌悬液为模板,PCR扩增得到ACR基因DNA片段。将扩增片段克隆于pGM-T载体中,得到载体pGM-T-ACR。分别将pET32a质粒和pGM-T-ACR质粒用限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,并将纯化的ACR基因亚克隆至pET32a中,获得重组表达质粒pET32a-ACR。将其转化***21IPTG诱导后,经SDS-PAGE、westernblot分析鉴定,可见约34ku的外源蛋白带。表明ACR基因在大肠杆菌中得到了表达。用Ni-NTAAgarose试剂盒进行蛋白纯化,获得纯化的ACR融合蛋白。

主 题 词：结核分枝杆菌 ACR 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

馆 藏 号：203733279...