牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：季新成 段琛 王克栋 史茜 于学辉 冉多良 JI Xin-cheng;DUAN Chen;WANG Ke-dong;SHI Qian;YU Xue-hui;RAN Duo-liang

作者机构：新疆出入境检验检疫局新疆乌鲁木齐830063 国际关系学院北京100091 新疆农业大学动物医学院新疆乌鲁木齐832052 

基　　金：新疆自治区高新技术项目(201010101 201141147) 国家质量监督检验检疫总局科研项目(2011IK017) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2014年第35卷第1期

页      码：17-21页

摘      要：为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5′-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288bp)。为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152bp)。通过反应条件的优化,建立了BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,该方法可以监测RNA提取与RT-PCR反应过程,指示假阴性结果的发生。该方法的检测灵敏度约为100TCID50/mL,且具有较好的特异性和可重复性。通过对566份临床样品检验,检测到阳性样品19份,阳性率3.36%。该方法可用于临床样品中BVDV检测,并可对检测结果进行质量控制。

主 题 词：牛病毒性腹泻病毒 内标 双重反转录-聚合酶链反应 共扩增 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2014.01.004

馆 藏 号：203735289...