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炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测技术的建立和应用

炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测技术的建立和应用

作     者:王素华 帅江冰 李舟 袁淑辉 吴绍强 吕继洲 赵治国 WANG Suhua;SHUAI Jiangbing;LI Zhou;YUAN Shuhui;WU Shaoqiang;L Jizhou;ZHAO Zhiguo

作者机构:温州海关综合技术服务中心温州325027 杭州海关技术中心杭州310016 中国检验检疫科学研究院动物检疫所北京100029 呼和浩特海关技术中心呼和浩特010020 

基  金:国家质检总局科技计划项目(2017IK098) 浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02044) 

出 版 物:《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期:2019年第50卷第8期

页      码:1658-1665页

摘      要:为快速和准确检测炭疽杆菌,本研究以炭疽杆菌染色体上的BA5345基因和pXO1质粒上的PA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立了炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,所建立方法特异性强,与蜡样芽胞杆菌群中其他芽胞杆菌无交叉反应;对BA5345基因和PA基因的最低检测限分别为8.0和7.8拷贝·μL^-1,标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对35份污染皮毛样品检测显示BA5345基因和PA基因的检出率分别为80.0%和82.9%,与常规PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为炭疽杆菌的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。

主 题 词:炭疽杆菌 BA5345基因 PA基因 双重荧光定量PCR 检测方法 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.11843/j.issn.0366-6964.2019.08.015

馆 藏 号:203738452...

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