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番茄果实特异性E8启动子的基因克隆与序列分析

番茄果实特异性E8启动子的基因克隆与序列分析

作     者:周晓红 陈晓光 张晓东 王亚楠 李林 习佳飞 胡建军 

作者机构:第一军医大学寄生虫学教研室广东广州510515 北京市农林科学院生物技术研究中心北京100084 第一军医大学学员一旅五队广东广州510515 

基  金:国家自然科学基金(30080024) 广东省自然科学基金(001052)~ 

出 版 物:《第一军医大学学报》 (Journal of First Military Medical University)

年 卷 期:2003年第23卷第1期

页      码:25-28页

摘      要:目的获取番茄果实特异性E8启动子基因,为实现外源基因在转基因番茄中果实特异性表达做准备。方法培养中蔬5号(Zhongshu No.5)番茄幼苗, 采集叶片,用Omega公司的植物基因组提取试剂盒提取番茄基因组DNA;设计引物,从基因组中通过PCR扩增获得番茄果实特异性E81.1和E82.2启动子基因;克隆进pGEM-T载体,酶切鉴定;送上海基康公司测序;序列分析。结果从番茄基因组DNA中PCR扩增得到预期大小的启动子片段;构建重组pGEM-T-E81.1和pGEM-T-E82.2载体,经酶切证实具有与目标片段长度相符的插入片段;测序结果分析显示:番茄果实特异性E8启动子序列高度保守,所获得的Zhongshu No.5 E82.2启动子DNA序列与Deikman报道的Cherry种的E82.2启动子同源性为99%, 登陆GenBank, ID号为AF515784。结论成功获得Zhongshu No.5番茄果实特异性E81.1、E82.2启动子基因,为下一步转基因番茄口服疫苗的研制奠定了一定的工作基础。

主 题 词:番茄 果实特异性E8启动子 基因克隆 序列分析 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1673-4254.2003.01.007

馆 藏 号:203740411...

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