应用巢式PCR法克隆N端部分缺失的IκBα基因

作     者：刘冰熔 黄爱龙 沈鼎明 

作者机构：哈尔滨医科大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150001 重庆医科大学第二临床学院重庆400010 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 70 2 97) 

出 版 物：《哈尔滨医科大学学报》 (Journal of Harbin Medical University)

年 卷 期：2001年第35卷第4期

页      码：238-241页

摘      要：目的　克隆中国人N端部分缺失的IκBα基因 ,为进一步应用其进行抗肿瘤基因治疗研究打下基础。方法　从中国人外周血中分离单核细胞 ,采用多聚赖氨酸贴壁刺激 0 .5h后提取总RNA。应用逆转录PCR法 ,以自行设计的引物扩增全序IκBα基因 ,应用巢式PCR法扩增N端部分缺失的IκBα基因 ,用TA克隆技术将目的基因连接到pGEM T质粒载体中 ,进行测序并与已知IκBα序列进行同源性分析。结果　测序结果表明我们所克隆的目的基因 ,其基因序列与GenBank中人IκBα基因序列仅有 5个碱基不同但所编码氨基酸仅 1个发生改变。结论　已成功克隆了中国人N端部分缺失的IκBα基因 ,为进一步应用N端部分缺失的IκBα基因进行抗肿瘤基因治疗研究打下了基础。

主 题 词：IκBα基因 巢式PCR 基因克隆 N端部分缺失 肿瘤 基因治疗 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 100214[100214] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-1905.2001.04.002

馆 藏 号：203740927...