日本乙型脑炎病毒E抗原表位的筛选

作     者：马丽敏 李琳 胡乐鹏 何晔 李叶 任秀梅 靳朝 夏志平 王本旭 MA Li-min;LI Lin;HU Le-peng;HE Ye;LI Ye;REN Xiu-mei;JIN Zhao;XIA Zhi-ping;WANG Ben-xu

作者机构：吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130017 北京军区疾病预防控制中心北京100042 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)课题(2009AA10Z4483730) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2012年第34卷第1期

页      码：60-63页

摘      要：为筛选日本乙型脑炎病毒(JEV)的E抗原表位,本实验以抗JEV E蛋白的单克隆抗体(MAb)作为固相筛选分子,应用噬菌体表面展示技术,按消减、结合、洗脱、扩增的顺序筛选噬菌体七肽库,挑取噬菌体单克隆培养并采用MAb包被的ELISA鉴定,对阳性克隆测序分析,确定JEV E抗原模拟表位的氨基酸序列。设计合成包含该表位的E抗原15肽(E-365GGADSMSMAGMAVSYE-379)cDNA序列,与pGEX-KG构建重组表达质粒,诱导表达重组多肽并进行western blot验证。经过4轮筛选后,噬菌体得到高度富集,挑取单克隆采用MAb包被进行ELISA鉴定,有22个克隆呈阳性。对重组多肽进行western blot验证,结果表明该重组多肽能够特异结合兔抗JEV多克隆抗体。本实验成功筛选出JEV结构蛋白E的特异性噬菌体模拟表位,为开展用JEV抗原表位探索JEV的防制研究创造了条件,为多肽疫苗研制、药物筛选以及特异血清学诊断方法的建立提供重要依据。

主 题 词：日本乙型脑炎病毒 噬菌体表面展示技术 E蛋白 表位肽 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2012.01.15

馆 藏 号：203742899...