重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的优化及蛋白免疫原性研究

作     者：李天增 潘晓梅 张伟 师小潇 徐龙飞 贺笋 LI Tian-zeng;PAN Xiao-mei;ZHANG Wei;SHI Xiao-xiao;XU Long-fei;HE Sun

作者机构：天康生物股份有限公司 

出 版 物：《中国兽药杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Drug)

年 卷 期：2019年第53卷第8期

页      码：30-35页

摘      要：为获得高蛋白含量和良好免疫原性的抗原,利用杆状病毒表达体系进行猪圆环病毒2型(PCV2)重组Cap蛋白表达,采取正交试验设计确定三因素(High five细胞浓度、病毒感染量、蛋白表达时间)的最佳组合,对重组病毒株vBac-SP-PCV2的表达条件进行优化,利用His Bind蛋白质纯化试剂盒对表达产物进行纯化,纯化蛋白作为标准蛋白用于Western blotting中蛋白质定量分析和蛋白免疫原性检测。结果显示:2.0×10^6/mLHigh five细胞浓度、1.5MOI病毒感染量、蛋白表达时间168h为重组PCV2-rCap蛋白表达的最佳条件,表达产物纯化良好,并能被PCV2多克隆抗体识别,免疫豚鼠可诱导产生高水平PCV2抗体。研究表明纯化PCV2-rCap蛋白可作为标准蛋白用于后续表达蛋白的定量分析和PCV2亚单位疫苗研发候选抗原。

主 题 词：PCV2-rCap蛋白 表达 纯化 免疫原性 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.11751/ISSN.1002-1280.2019.08.05

馆 藏 号：203744305...