鳜鱼TCRα基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者：吴明皇 常藕琴 石存斌 吴淑勤 WU Ming-huang;CHANG Ou-qin;SHI Cun-bin;WU Shu-qin

作者机构：大连海洋大学生命科学与技术学院辽宁大连116023 中国水产科学研究院珠江水产研究所广东广州510380 

基　　金：国家公益性行业(农业)科研专项(200803013) 

出 版 物：《广东农业科学》 (Guangdong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2011年第38卷第6期

页      码：1-5页

摘      要：根据GeneBank上鳜鱼TCRα基因序列设计并合成特异性引物,以鳜鱼β-actin基因为内参,采用RT-PCR方法从鳜鱼的胸腺总RNA中扩增得到鳜鱼TCRα和β-actin基因,将目的片段纯化后克隆到PMD18-T载体上,测序鉴定。以阳性质粒为标准品,采用SYBR GreenⅡ染料法进行实时荧光定量PCR扩增,构建标准曲线并进行溶解曲线分析。结果表明,鳜鱼TCRα基因的Ct值与标准品稀释度在102～108拷贝/μL范围呈良好的线性关系,r2达0.99以上,溶解曲线分析表明产物为特异的单峰。

主 题 词：鳜鱼 TCRα基因 实时荧光定量PCR 

学科分类：090801[090801] 0908[0908] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-874X.2011.06.001

馆 藏 号：203749465...