携带标记基因的慢病毒载体转染人脐带华通胶间充质干细胞的实验研究

作     者：王力 徐小红 张宁坤 高连如 朱智明 WANG Li;XU Xiaohong;ZHANG Ningkun;GAO Lianru;ZHU Zhiming

作者机构：第二军医大学海军临床医学院北京100048 中国人民解放军海军总医院心脏中心 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(项目编号:81170094) 

出 版 物：《天津医药》 (Tianjin Medical Journal)

年 卷 期：2013年第41卷第10期

页      码：985-988,I0004页

摘      要：目的探讨含有增强型绿色荧光蛋白标记基因的慢病毒（Lentivirus—EGFP）体外转染人脐带华通胶间充质干细胞（HUWMSCs）的最佳方案及其对细胞增殖活性的影响。方法设计A、B、C、D共4种转染方案，分别以1、10、100的感染复数（MOI）转染体外培养的HUWMSCs，荧光显微镜及流式细胞仪检测各组荧光表达强度及转染效率，MTT法检测细胞增殖倍数。结果转染4d后所有实验组转染率在10．6％～87．3％，并与MOI值存在量效关系，聚凝胺（5mg／L）可显著增加病毒转染效率（P〈O．05）。MTT实验结果显示，与对照组比较，不同转染方案细胞增殖存在显著差异（P〈0．001）。A方案MOI=10组及B方案MOI=10组细胞增殖情况较其他组好。结论B方案MOI=10实验组为最佳转染方案。Lentivirus—EGFP能高效转染HUWMSCs且在2周内稳定表达转染基因，是一种安全、有效的基因转移载体。

主 题 词：间质干细胞 流式细胞术 慢病毒属 遗传载体 基因疗法 转染 细胞增殖 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.0253-9896.2013.10.012

馆 藏 号：203750506...