马链球菌兽疫亚种串联表达蛋白对小鼠免疫效果的评价

作     者：周红 李月 李成贵 范红结 ZHOU Hong;LI Yue;LI Cheng-gui;FAN Hong-jie

作者机构：南京农业大学动物医学院江苏南京210095 

基　　金：国家自然科学基金项目(31272581 31172319) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2015年第45卷第11期

页      码：1136-1141页

摘      要：根据马链球菌兽疫亚种类M蛋白（SzP）、纤维结合素结合蛋白（FNZ）、IgG结合蛋白（ZAG）的基因序列,分别设计并合成引物。以马链球菌兽疫亚种ATCC35246的基因组为模板,扩增szp（527-1 044bp）、fnz（1 012-1 519bp）、zag（134-664bp）基因序列,并构建原核表达载体pET-32a（＋）-szp、pET-32a（＋）-fnz、pET-32a（＋）-zag。确定诱导表达的三种蛋白都具有免疫原性后,通过PCR串联的方法,将以上3个目的片段同时串联克隆到表达载体pET-32a（＋）中。重组质粒转化入大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导表达分子质量约为74ku的串联融合蛋白SzP-FNZ-ZAG。免疫印迹分析结果表明,上述融合蛋白能够与ATCC35246鼠源多克隆抗体发生结合反应。分别用纯化的单个蛋白和串联重组蛋白免疫ICR小鼠,能够诱导免疫小鼠产生较高效价的血清抗体,串联重组蛋白对致死剂量的马链球菌兽疫亚种强毒菌株的攻击具有90%的免疫保护率,显著高于单个蛋白。RT-PCR检测显示,免疫小鼠IL-4、IFN-γ基因的转录水平显著高于空白对照组小鼠。

主 题 词：马链球菌兽疫亚种 融合表达 免疫效力 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2015.11.006

馆 藏 号：203751542...