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柑橘4种病毒多重PCR检测技术的建立及应用

柑橘4种病毒多重PCR检测技术的建立及应用

作     者:黄爱军 王莹 丁敏 卢占军 易龙 HUANG Aijun;WANG Ying;DING Min;LU Zhanjun;YI Long

作者机构:赣南师范大学生命科学学院国家脐橙工程技术研究中心 

基  金:江西省重点研发计划项目(20161ACF60016) 国家自然科学基金项目(31860488) 

出 版 物:《园艺学报》 (Acta Horticulturae Sinica)

年 卷 期:2019年第46卷第8期

页      码:1616-1622页

摘      要:柑橘衰退病毒(CTV)、柑橘碎叶病毒(CTLV)、柑橘黄化脉明病毒(CYVCV)和柑橘叶斑驳病毒(CLBV)是影响柑橘生产的重要病毒性病害,建立快速、准确的检测方法是防控该病害的基础。本研究通过筛选针对4种病毒基因组保守区域设计的特异性引物,优化影响多重RT-PCR扩增的引物浓度、退火温度,建立了可同时扩增4种病毒的多重RT-PCR检测体系。该检测体系扩增的特异片段大小分别是CTLV 889 bp、CYVCV 612 bp、CTV 462 bp和CLBV 294 bp,扩增产物清晰,特异,检测灵敏度较普通单重RT-PCR灵敏度低约10倍。采用多重RT-PCR和单重RT-PCR对收集到的59份田间样品分别进行检测,结果显示2种方法检测结果一致,4种病毒的检出率在11.9%~54.2%之间。建立的多重RT-PCR方法可准确、快速、灵敏地检测单一或复合侵染的4种柑橘病毒。

主 题 词:柑橘 柑橘衰退病毒 柑橘碎叶病毒 柑橘黄化脉明病毒 柑橘叶斑驳病毒 多重PCR 

学科分类:09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

核心收录:

D O I:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0782

馆 藏 号:203752411...

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