利用pIRES载体构建TCR独特型重组质粒

作     者：黄梅娟 李扬秋 杨力建 陈少华 HUANG Meijuan;LI Yangqiu;YANG Lijian;CHEN Shaohua

作者机构：青岛大学医学院第二附属医院青岛市中心医院血液科山东省青岛市266044 暨南大学医学院血液病研究所广州市510632 

基　　金：中德生物技术合作项目(No.CHN02/319) 广东省科技计划项目(No.2002C1040501) 广州市国际合作交流项目(No.2003J1-I0011)~~ 

出 版 物：《医学分子生物学杂志》 (Journal of Medical Molecular Biology)

年 卷 期：2008年第5卷第5期

页      码：399-402页

摘      要：目的利用可同时表达两个基因片段的pIRES作为载体,构建TCR独特型重组质粒,为制备诱导抗T细胞肿瘤免疫的TCR独特型DNA疫苗提供基础。方法设计引物,提取Jurkat及Molt4细胞株RNA为模板,RT-PCR法特异性扩增CDR3区,与pIRES经酶切连接后氯化钙法转化,重组质粒经酶切鉴定后测序。结果构建出3种重组质粒pIRES-Jurkat Vβ8、pIRES-Molt4 Vβ2①和pIRES-Molt4 Vβ2②,其中pIRES-Molt4 Vβ2②测序正确,可体外表达Vβ2蛋白。结论利用真核表达载体pIRES可成功构建TCR重组质粒,并有可能用于进一步克隆佐剂基因片段入pIRES的多克隆位点,提高DNA疫苗的免疫原性。

主 题 词：pIRES载体 T细胞受体 独特型 重组质粒 佐剂 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3870/j.issn.1672-8009.2008.05.005

馆 藏 号：203756122...