运用siRNA抑制K562细胞中端粒酶逆转录酶基因表达的研究

作     者：王方金 吴健 王伟毅 何蕴韶 

作者机构：中山大学中山医学院广州510080 中山大学达安基因诊断中心 

出 版 物：《临床内科杂志》 (Journal of Clinical Internal Medicine)

年 卷 期：2005年第22卷第5期

页      码：330-332页

摘      要：目的　建立利用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制白血病细胞系K562细胞中端粒酶活性的方法,为肿瘤的基因治疗提供理论依据。方法　设计端粒酶逆转录酶(hTERT)基因特异性siRNA,用体外转录方法合成hTERT基因的siRNA并转染K562细胞,培养48小时后,收集细胞,应用实时荧光定量RT PCR和westernblot方法检测转染细胞中hTERT基因mRNA水平和蛋白表达量的变化,并运用TRAPELISA方法检测细胞内端粒酶活性的变化。结果　转染siRNA后,与对照组相比,实验组hTERTmRNA水平和蛋白表达量明显降低,抑制率分别为75%和60%,同时TRAPELISA方法检测发现实验组端粒酶活性仅为对照组活性的45%。结论　hTERTsiRNA能特异性的抑制hTERT基因的表达,降低端粒酶活性,因此运用siRNA来抑制hTERT的表达可达到降低端粒酶活性的效果。

主 题 词：小分子干扰RNA RNA干扰 端粒酶 端粒酶逆转录酶基因 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-9057.2005.05.016

馆 藏 号：203756784...