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利用Fine-tiling aCGH分析TCR基因重排鉴定T细胞白血病克隆

利用Fine-tiling aCGH分析TCR基因重排鉴定T细胞白血病克隆

作     者:郑海涛 叶铁真 陈少华 杨力建 卢育洪 李扬秋 

作者机构:暨南大学医学院血液病研究所 广州市妇女儿童医疗中心血液肿瘤科 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 

基  金:国家自然科学基金资助项目(30871091) 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(21610603) 

出 版 物:《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期:2011年第27卷第5期

页      码:483-486页

摘      要:目的:建立基于分析T细胞受体(TCR)基因重排而确定T细胞-急性淋巴细胞白血病(T-ALL)克隆的新方法,为研究T-ALL中涉及TCR基因位点的染色体易位提供基础。方法:提取1例T-ALL患者外周血单个核细胞(PBMC)的总DNA,利用精细定位的寡核苷酸阵列比较基因组杂交(fine-tiling aCGH)分析样本与对照组基因组DNA的差异,了解不同染色体上可能的断裂点和具体的位点,根据所提供的初步结果,从断裂点涉及的基因序列设计特异引物,采用连接介导PCR(LM-PCR)和序列分析等方法去找出与之发生重排的基因序列。并进一步通过RT-PCR检测TCR基因表达。结果:该例T-ALL患者fine-tiling aCGH结果显示14染色体TCRα/δ基因座出现4个断裂点,分别对应TCR Vδ1、Vδ2、Jδ1和Jδ2基因位点。通过LM-PCR、测序及序列分析,该例T-ALL患者的PBMC中TCR基因涉及Vδ1Dδ2Dδ3 Jδ1、Vδ2Dδ3 Jδ2重排。RT-PCR的结果也验证T-ALL表达该TCR基因重排。结论:结果表明,利用fine-tiling aCGH及LM-PCR技术可以找出TCR基因重排,并且该方法是可靠的,也是发现一些涉及TCR位点的融合基因的一条途径。

主 题 词:Fine-tilingaCGH LM-PCR TCR基因重排 

学科分类:1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13423/j.cnki.cjcmi.006015

馆 藏 号:203757680...

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