FasL基因构建 蛋白表达及其对胃癌细胞株BGC823和MGC803生长的影响

作     者：刘忠臣 李文珠 齐忠权 丁志杰 袁思波 牛丽文 庄国洪 LIU Zhongchen;LI Wenzhu;QI Zhongquan;DING Zhijie;YUAN Sibo;NIU Liwen;ZHUANG Guohong

作者机构：厦门大学附属中山医院胃肠外科福建省厦门市361000 厦门大学医学院抗癌中心 

基　　金：福建省自然科学基金资助(编号:C0710046)~~ 

出 版 物：《中国肿瘤临床》 (Chinese Journal of Clinical Oncology)

年 卷 期：2009年第36卷第18期

页      码：1067-1070页

摘      要：目的:构建适于原核表达的重组蛋白FasL表达载体,并进行重组蛋白的表达纯化及抗肿瘤活性分析。方法:获得人FasL cDNA全序列,将其分段设计引物,通过重叠PCR获得FasL基因。构建pGEX-5X-1/FasL表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,GST柱纯化。采用MTT比色法、流式细胞法检测融合蛋白对胃癌细胞的作用。结果:通过重叠PCR获得了编码正确氨基酸序列的目的基因。表达的目的蛋白表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。MTT比色法与流式细胞技术均表明纯化的融合蛋白能抑制胃癌细胞株BGC823和MGC803的生长,诱导其调亡增加。结论:重组蛋白FasL表达载体的成功构建、表达、纯化及活性分析,为进一步的抗肿瘤功能研究奠定了基础。

主 题 词：FasL 肿瘤 凋亡 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-8179.2009.18.015

馆 藏 号：203758333...