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一种新型广谱流感病毒亚单位疫苗的表达与纯化

一种新型广谱流感病毒亚单位疫苗的表达与纯化

作     者:魏义举 龙海亭 杨旭 李建芳 毕研伟 李健峰 徐维明 WEI Yi-ju;LONG Hai-ting;YANG Xu;LI Jian-fang;BI Yan-wei;LI Jian-feng;XU Wei-ming

作者机构:中国协和医科大学/中国医学科学院医学生物研究所昆明650118 

基  金:云南省自然科学基金资助项目(2005C0062M) 

出 版 物:《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期:2007年第27卷第5期

页      码:90-95页

摘      要:通过引物设计,利用重叠延伸PCR(OE-PCR)和搭桥PCR方法扩增得到A型流感病毒M2蛋白缺失跨膜区基因以及HA多表位基因,分别克隆测序后以pET28a+为表达载体构建重组质粒pET28a+-M2d-HA。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选获得了高效表达流感病毒缺失跨膜区M2蛋白和HA多表位蛋白片段重组融合蛋白的工程菌,表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的45%左右。表达的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经亲和层析和阴离子交换层析纯化后复性,得到纯度在90%以上的目的蛋白。Westernblot结果显示纯化的重组蛋白具有较好的抗原性和特异性。为进一步研究广谱型流感病毒亚单位疫苗奠定了基础。

主 题 词:流感病毒 亚单位疫苗 多表位 表达纯化 抗原性 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.13523/j.cb.20070518

馆 藏 号:203763195...

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