活力高于天然谷胱甘肽过氧化物酶的含硒抗体酶

作     者：丁兰 赵大庆 倪嘉缵 罗贵民 刘仔 

作者机构：中国科学院长春应用化学研究所稀土化学与物理开放实验室长春130022 吉林大学酶工程国家重点实验室长春130023 长春农牧大学军事兽医研究所长春130021 

基　　金：中国科学院基础局重大项目基金资助 

出 版 物：《中国科学（B辑）》 (Science in China(Series B))

年 卷 期：1997年第27卷第4期

页      码：293-300页

摘      要：还原型谷胱甘肽(GSH)的巯基和两个羧基分别与2,4-二硝基氯苯(DNCB)和甲醇反应,合成出半抗原Hp2;通过戊二醛将Hp2连到牛血清白蛋白(BSA)上,合成出全抗原Ag2;吸收光谱法测出Hp2在BSA上的平均连接量为30.2mol/mol.用标准的单克隆抗体(McAb)制备技术,制备出阳性McAb(IgG)-4G3;4G3对GSH和半抗原Hp2的解离常数(K_D)表明,单克隆抗体4G3对GSH具有较强的亲和力.对4G3进行两步化学诱变(Chemical Mutation),诱变后即为具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的含硒抗体酶(m4G3),m4G3的GPX活力为9337U/μmol,是兔肝GPX(RL-GPX,5780U/μmol)的 1.6倍,曾报道的含硒抗体酶m4A4(1239 U/μmol)的7.5倍,制备出活性高于天然酶的抗体酶,证实了半抗原设计思想.将m4G3拆分成Fab和Fc片段,发现m4G3的活性中心位于Fab片段上,m4G3的硒代半胱氨酸(Se-Cys)含量为1.9 mol/mol.

主 题 词：谷胱甘肽 过氧化物酶 硒 抗体酶 半抗原设计 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 

核心收录：

馆 藏 号：203763671...