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拟蜘蛛拖丝蛋白基因人工合成及其原核表达

拟蜘蛛拖丝蛋白基因人工合成及其原核表达

作     者:王春生 原璐 罗芳 梁洋 安铁洙 WANG Chun-sheng;YUAN Lu;LUO Feng;LIANG Yang;AN Tie-zhu

作者机构:东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 

基  金:国家自然科学基金(30751325 30771538)资助 东北林业大学引进人才科研启动基金资助 

出 版 物:《四川动物》 (Sichuan Journal of Zoology)

年 卷 期:2010年第29卷第2期

页      码:184-188页

摘      要:根据GenBank上蜘蛛拖丝蛋白基因序列(AY555585和AH015065)、拖丝蛋白基因的结构特点和密码子的简并性,设计378bp的拖丝蛋白基因单体,并对其人工聚合成二聚体。Primer5.0分析结果表明,决定拖丝弹性和抗拉力的氨基酸(Gla和Ala)含量(41.43和18.22)接近天然丝蛋白氨基酸含量(42.81和26.32);利用Antheprot软件对二聚体编码氨基酸的二级结构预测结果显示,与丝蛋白的氨基酸链相近,由2个相同的部分排列而成,即β-片层(占48%)、6个α-螺旋间隔(占15%)、散在的转角(占12%)和若干不规则卷曲(占25%)。将二聚体与pET-28a(+)连接构建原核表达载体,IPTG诱导重组菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量为26.6×103kD的重组蛋白。上述结果为进一步开展有关转蜘蛛拖丝蛋白基因在绵羊被毛中表达的研究奠定了基础。

主 题 词:拖丝蛋白基因 人工合成 二聚体 原核表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

馆 藏 号:203764286...

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