松毛虫mtDNA PCR反应体系优化

作     者：张学卫 吴丽欣 高宝嘉 ZHANG Xue-wei;WU Li-xin;GAO Bao-jia

作者机构：河北农业大学林学院河北保定071000 河北北方学院河北张家口075000 

基　　金：国家自然科学基金项目(30771739) 

出 版 物：《河北农业大学学报》 (Journal of Hebei Agricultural University)

年 卷 期：2010年第33卷第4期

页      码：77-80页

摘      要：为了应用线粒体DNA研究松毛虫种群的遗传结构,本研究采用正交试验设计法L16(45)对影响松毛虫mtDNA PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验并对PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了单因素梯度比较优化。建立了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳体系即在50μL体系中含模板150 ng、0.10μmol/L引物、0.4 mmol/L dNTP、1.0UTaq DNA聚合酶、2.5 mmol/LMg2+。同时通过PCR比较,确定最佳循环次数为35个循环,最佳退火温度为56℃,获得了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳扩增程序。

主 题 词：松毛虫 PCR反应体系 正交设计 优化 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-1573.2010.04.016

馆 藏 号：203764452...