氯噻啉酶联免疫分析方法研究

作     者：方松 张斌 施海燕 王鸣华 FANG Song;ZHANG Bin;SHI Hai-yan;WANG Ming-hua

作者机构：南京农业大学植物保护学院农药科学系/农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室南京210095 

出 版 物：《农药学学报》 (Chinese Journal of Pesticide Science)

年 卷 期：2011年第13卷第3期

页      码：287-292页

摘      要：建立了基于多克隆抗体的氯噻啉间接竞争酶联免疫分析(ic-ELISA)方法。设计合成了氯噻啉半抗原,将其分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫原和包被原。用免疫原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,抗体效价为2.56×106。通过对有机溶剂含量、离子强度和pH等影响因素的优化,确定了氯噻啉ic-ELISA的最佳检测条件(含体积分数10%甲醇的磷酸盐缓冲液、Na+浓度为0.14 mol/L、pH 7.4),并建立了氯噻啉标准竞争曲线,该方法的抑制中浓度(IC50)为0.18 mg/L,最低检测限(IC10)为0.001 8 mg/L。所得多克隆抗体除与吡虫啉有较大的交叉反应外,与其他结构相似的化合物无明显交叉反应。在水、土壤和甘蓝中分别添加0.05～1 mg/kg的氯噻啉标准溶液,平均回收率为91.42%～113.82%,相对标准偏差(RSD)为0.72%～8.68%,符合农药残留检测要求。该ELISA方法可用于环境及农产品中氯噻啉残留检测。

主 题 词：氯噻啉 半抗原 多克隆抗体 酶联免疫 

学科分类：090403[090403] 1001[医学-基础医学] 09[农学] 100102[100102] 0904[农学-动物医学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-7303.2011.03.13

馆 藏 号：203764798...