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果蝇心脏发育标记基因Kruppel的多克隆抗体制备

果蝇心脏发育标记基因Kruppel的多克隆抗体制备

作     者:黄婷 雷旻音 朱玲 刘腾 江志钢 吴秀山 邓云 HUANG Ting;LEI Minyin;ZHU Ling;LIU Teng;JIANG Zhigang;WU Xiushan;DENG Yun

作者机构:湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心湖南长沙410081 

基  金:国家自然科学基金项目(30900851) 

出 版 物:《激光生物学报》 (Acta Laser Biology Sinica)

年 卷 期:2012年第21卷第3期

页      码:252-256页

摘      要:Kruppel在果蝇发育过程中起着重要的调控作用。为了进一步研究Kruppel的功能,需要制备Kruppel蛋白及其抗体.对已有的Kruppel序列进行分析,选取适当区域进行引物设计,从果蝇心脏cDNA文库中PCR扩增得到Kruppel部分编码区序列,并其连接到pET-28a载体上。将重组质粒(pET-28a-Kruppel)转化rosetta受体菌,通过IPTG(Isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导表达融合蛋白,用镍柱进行亲和纯化。将纯化得到的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blot检测抗体的效价。

主 题 词:Kruppel 融合蛋白 果蝇 多克隆抗体 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 

D O I:10.3969/j.issn.1007-7146.2012.03.011

馆 藏 号:203765421...

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