激活转录因子-2调控小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶-20分子机制的初步研究

作     者：王文江 冯琦 袁杰 高玉光 WANG Wen-jiang;FENG Qi;YUAN Jie;GAO Yu-guang

作者机构：安徽省蚌埠市第一人民医院口腔科233000 甘肃省平凉市人民医院口腔科744000 滨州医学院附属医院口腔科山东滨州256603 

出 版 物：《蚌埠医学院学报》 (Journal of Bengbu Medical College)

年 卷 期：2014年第39卷第11期

页      码：1460-1463页

摘      要：目的:通过克隆激活转录因子-2(ATF-2)基因以及真核表达载体的构建,初步研究ATF-2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶-20(MMP-20)基因表达的影响。方法:根据引物设计原则设计ATF-2基因逆转录-聚合酶链反应(PCR)引物,从小鼠成釉细胞中提取总RNA逆转录所得c DNA为模板,进行PCR法扩增。得出含有HindⅢ和xhol酶切位点的ATF-2目的基因连接到pc DNA 3.1/myc-His A真核表达载体上;用重组质粒转染小鼠MMP-20基因,观察其对MMP-20基因转录活性的影响。结果:经过PCR引物扩增得到1 463 bp基因片段,将获得的重组质粒pc DNA 3.1/myc-His A-ATF-2双酶切分析鉴定,测序结果与Gen Bank登录基因序列完全一致;双荧光素酶结果显示ATF-2可以促进MMP-20启动子的表达(P<0.01),且在-825^+23(848 bp)启动子区段促进作用最明显。结论:成功实现了ATF-2基因克隆及真核表达载体的构建,并发现ATF-2对MMP-20启动子区域活性表达起正向调节作用。

主 题 词：激活转录因子-2 基因克隆 载体构建 小鼠 

学科分类：1003[医学-口腔医学类] 100301[100301] 10[医学] 

D　O　I：10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2014.11.002

馆 藏 号：203766613...