10-23脱氧核酶对新生大鼠心肌细胞ET-1 mRNA表达的影响

作     者：潘秀颉 林丽 潘燕霞 袁文俊 

作者机构：第二军医大学基础医学部生理学教研室上海2004332 

基　　金：国家重点基础研究规划 ("973"计划 )课题( G2 0 0 0 0 5 690 5 ) 国家自然科学基金 ( 3 0 0 70 3 0 6 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2004年第25卷第10期

页      码：1106-1109页

摘      要：目的 :将体外筛选具有切割内皮素 - 1(endothelin- 1,ET- 1) m RNA的 10 - 2 3脱氧核酶转染原代培养新生大鼠心肌细胞 ,观察其对心肌细胞 ET- 1m RNA的影响。 方法 :体外转录 ET- 1全长 RNA底物 ,设计并合成 5条 ET- 110 - 2 3脱氧核酶(DZ1～ DZ5 ) ,其 5′及 3′端各有 2个核苷酸硫代修饰 ,体外切割 ET- 1RNA底物 ,筛选有效脱氧核酶 ;5′标记荧光素 FAM的10 - 2 3脱氧核酶瞬间转染新生大鼠心肌细胞以观察对 10 - 2 3脱氧核酶的摄取 ;采用半定量 RT- PCR检测 ET- 1基因的表达。结果 :DZ2、DZ3、DZ4及 DZ5在体外均可切割 RNA底物 ,其中 DZ4两侧结合区结合自由能之差最大 ,其切割效率最高 ,达83.5 % ,而 DZ3两侧结合区结合自由能之差最小 ,其切割效率亦最低 (4 7.3% ) ;瞬间转染新生大鼠心肌细胞 2 4 h,心肌细胞内可见 10 - 2 3脱氧核酶的分布 ,半定量 RT- PCR结果显示转染 2 4 h后的 DZ4 (0 .2 μmol/ L)可减少血清诱导肥大心肌细胞 ET- 1m RNA及细胞总蛋白 ,降低细胞活力与蛋白质合成速率 (P<0 .0 5 )。 结论 :本研究设计的 10 - 2 3脱氧核酶能切割体外转录的ET- 1全长 RNA底物 ,转染心肌细胞后 ,可抑制 ET- 1m RNA的表达 ,减缓血清诱导心肌细胞肥大 ,10 - 2

主 题 词：10-23脱氧核酶 内皮素 心肌细胞 肥大 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0258-879X.2004.10.007

馆 藏 号：203771156...