日本血吸虫中国大陆株琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白的克隆与表达

作     者：余俊龙 汪世平 何卓 戴橄 姜孝新 曾少华 肖晓芹 周松华 李文凯 徐绍锐 吕志跃 彭先楚 YU Jun-long;WANG Shi-ping;HE Zhuo;DAI Gan;JIANG Xiao-Xin;ZENG Shao-hua;XIAO Xiao-qing;ZHOU Song-hua;LI Wen-kai;XU Shao-rui;L(U) Zhi-yue;PENG Xian-chu

作者机构：中南大学湘雅医学院病原生物学系长沙410078 

基　　金：国家"十五"重大科技专项(2002AA2Z3343) 国家863重大计划(2004AA2Z3530) 湖南省"十一五"重大专项 湖南省重点学科建设专项经费(03-985-3-7) 

出 版 物：《中南大学学报（医学版）》 (Journal of Central South University ：Medical Science)

年 卷 期：2006年第31卷第4期

页      码：458-463页

摘      要：目的:克隆日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白(SjSDISP)全长编码基因,并对所获基因在大肠杆菌中进行表达。方法:根据基因库中SjSDISP对应的EST(BU804141)以及日本血吸虫成虫cDNA文库载体λgt11多克隆位点邻近核苷酸序列设计引物,以日本血吸虫成虫cDNA文库为模板,采用锚式PCR对SjSDISP基因不完整的3′端和5′端进行扩增、测序,用电子软件拼接成全长cDNA,将其克隆到表达载体pGEX-4T-1上,经琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶消化、PCR和测序鉴定后,选择阳性克隆进行表达及Western印迹分析。结果:获得1071bp全长cDNA,其理论推导为编码278个氨基酸残基的蛋白质。SjSDISP基因在大肠杆菌BL21中获得良好表达。该融合表达产物相对分子质量约为56kD,且能被日本血吸虫成虫抗原免疫血清特异识别。结论:编码日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白全长cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达获得成功。

主 题 词：日本血吸虫 琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白 基因克隆 基因表达 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1672-7347.2006.04.002

馆 藏 号：203771727...