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五重荧光定量RT-PCR法检测呼吸道病毒

五重荧光定量RT-PCR法检测呼吸道病毒

作     者:崔大伟 郑书发 范剑 楼滨 余斐 秦志梅 邹伟华 吴英萍 陈凌晓 陈瑜 

作者机构:浙江大学医学院附属第一医院检验科杭州310003 湖州市中心医院检验科浙江湖州313000 

基  金:"十一五"国家科技重大专项(2009ZX10004-210) 

出 版 物:《临床检验杂志》 (Chinese Journal of Clinical Laboratory Science)

年 卷 期:2011年第29卷第5期

页      码:333-335页

摘      要:目的建立一种五重荧光定量RT-PCR检测并鉴别流感病毒A(Flu A)、流感病毒B(Flu B)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及新甲型H1N1流感病毒(nH1N1)的方法。方法以人细胞RNA酶P基因为内参,用Primer Express 3.0设计PCR引物和探针。用一系列不同滴度的病毒培养物和不同来源的呼吸道病毒分别进行灵敏度和特异性分析。结果该法灵敏度较好,可测半数组织培养感染剂量(TCID50/mL)为0.02~0.2的病毒量,特异性达100%,每对引物和探针只检测出相应的病毒,无交叉反应。已确诊的nH1N1、Flu B、RSV感染患者的样本用该法均成功地测出。结论建立的五重荧光定量RT-PCR法灵敏度和特异性都较高,可检测出多种呼吸道病毒,对临床呼吸道病毒感染的诊断有一定的价值。

主 题 词:多重RT—PCR 新甲型Hl N1流感病毒 呼吸道合胞病毒 流感病毒 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13602/j.cnki.jcls.2011.05.008

馆 藏 号:203772204...

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