反义MBD1基因片段真核表达载体的构建及鉴定

作     者：左石 郭伟 邹声泉 ZUO Shi;GUO Wei;ZOU Sheng-quan

作者机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科武汉430030 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)基金资助项目(2002AA214061) 

出 版 物：《中华普通外科杂志》 (Chinese Journal of General Surgery)

年 卷 期：2006年第21卷第4期

页      码：293-295页

摘      要：目的构建反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因功能提供工具。方法根据MBD1基因cDNA序列中编码序列,设计PCR引物,在引物5′端分别添加Xba I和Kpn I 酶切位点,将PCR片段反向插入真核表达载体pcDNA3．1(+)的多克隆位点上,构建反义MBD1基因片段真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR鉴定得到322 bp特异性条带, 双酶切得到327 bp目的基因片段和5．4 kb载体片段,DNA测序说明插入片段序列是正确的。结论采用基因克隆技术,成功构建了反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因在DNA甲基化和肿瘤发生中的功能提供了实验工具。

主 题 词：克隆,分子 基因表达 质粒 RNA,反义 甲基磷酸胞苷酰鸟苷结合蛋白1 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/j.issn:1007-631X.2006.04.021

馆 藏 号：203773779...