长柄石杉ISSR-PCR反应体系的建立与正交优化

作     者：宋育红 叶祖禄 张杭颖 张君诚 Song Yuhong;Ye Zulu;Zhang Hangying;Zhang Juncheng

作者机构：福建省三明市三明学院应用生物技术研究所福建三明365004 福建省三明市三明学院化学与生物工程系福建三明365004 

基　　金：福建省自然科学基金计划资助项目"三明地区石杉科植物种质资源遗传多样性的分子分析"(2008J0301) 福建省科技厅重点项目"福建省石杉科植物资源 遗传多样性及药用内生菌筛选研究"(2010N0027) 

出 版 物：《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)

年 卷 期：2010年第26卷第21期

页      码：37-42页

摘      要：长柄石杉ISSR反应体系的建立能为利用ISSR标记技术进行长柄石杉品种鉴别、分类、种质资源遗传多样性分析奠定良好基础。利用正交试验设计的方法,从dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度和Mg2+浓度4种因素,对长柄石杉ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度进行梯度检测。结果表明,20μLISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度为1×PCRbuffer、300μmol/LdNTP、0.2μmol/L引物、2.0mmol/LMg2+、1.75UTaqDNA聚合酶、40ng模板DNA。该优化体系的建立为下一步进行长柄石杉ISSR分子标记奠定了基础。

主 题 词：长柄石杉 ISSR-PCR 反应体系 正交优化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

馆 藏 号：203773863...