霍乱弧菌三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作     者：万莹 陈永军 任亚玲 王亚磊 王权 蒋蔚 WAN Ying;CHEN Yong-jun;REN Ya-ling;WANG Ya-lei;WANG Quan;JIANG Wei

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 

基　　金：上海市科学技术委员会科研计划项目(17140900400) 国家重点研发计划项目(2017YFC1200201) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2019年第49卷第9期

页      码：1143-1151页

摘      要：为建立一种基于TaqMan探针法定量检测霍乱弧菌的三重荧光定量PCR方法,以霍乱弧菌种特异性基因ompW和毒力基因ctx、hly为靶基因,分别设计特异性引物及相应的TaqMan探针。在ompW、ctx、hly探针的5’端分别标记CY5、FAM、HEX荧光报告基团,3’端均标记BHQ1荧光淬灭基团。结果显示,本试验建立的三重荧光定量PCR方法与其他菌株无交叉反应,其最低检出限达到了10 CFU/m L,重复性试验中每组变异系数均小于1.4%;检测人工染菌的虾肉和贝类样品时,最低检出限也达到1×102CFU/m L。结果表明,本实验室建立的三重荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强和重复性好的特点,是高通量检测致病性霍乱弧菌的有效手段。

主 题 词：霍乱弧菌 ctx hly ompW 三重荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0154

馆 藏 号：203778164...