葛根SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

作     者：尚小红 严华兵 曹升 谢向誉 张尚文 王艳 欧昆鹏 ShangXiaohong;Yan Huabing;Cao Sheng;Xie Xiangyu;Zhang Shangwen;WangYan;Ou Kunpeng

作者机构：广西壮族自治区农业科学院经济作物研究所南宁530007 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所南宁530007 广西壮族自治区农业科学院广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室南宁530007 

基　　金：广西科技基地和人才专项项目(桂科AD17195072) 广西重点研发计划项目(桂科AB16380087) 广西藤县粉葛试验站项目(桂TS201431)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2019年第17卷第16期

页      码：5368-5374页

摘      要：为了更好地将SRAP分子标记技术应用于葛根上,本研究采用正交设计对葛根的SRAP-PCR反应体系进行优化,并筛选适用于葛根的SRAP引物。结果表明,葛根SRAP-PCR反应最优体系为20μL:DNA40 ng,Mg2+浓度1.5 mmol/L,dNTPs浓度0.25 mmol/L,引物浓度0.6μmol/L,Taq DNA聚合酶0.5 U。各因素对葛根SRAP-PCR扩增效果影响大小依次为:dNTP>Taq DNA聚合酶>Mg2+>引物>DNA模板量。利用该最优体系筛选获得了91对可在葛根中扩增出清晰条带的引物组合。以3组引物组合对6个葛根材料进行PCR扩增,产物重复性好、稳定且具有多态性。本研究优化的葛根SRAP-PCR反应体系及筛选出的引物为葛根相关分子生物学研究提供了技术基础。

主 题 词：葛根(Pueraria DC.) SRAP-PCR 反应体系优化 引物筛选 

学科分类：1008[医学-中药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.017.005368

馆 藏 号：203779073...