Myostatin基因沉默绵羊成纤维细胞系的建立

作     者：唐大运 朱化彬 吴健敏 杜卫华 王栋 赵学明 陈汉忠 林秀坤 TANG Da-yun;ZHU Hua-bin;WU Jian-min;DU Wei-hua;WANG Dong;ZHAO Xue-ming;CHEN Han-zhong;LIN Xiu-kun

作者机构：广西大学动物科技学院南宁530004 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 广西兽医研究所南宁530001 

基　　金：转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08010-024B 2008ZX08008-003 2009ZX08006-013B) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2011年第42卷第10期

页      码：1368-1373页

摘      要：旨在获得肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因沉默的成纤维细胞系,为进一步探索Myostatin的调控机理,获得Myostatin的基因沉默的转基因羊奠定基础。针对小尾寒羊Myostatin的基因序列,设计4条siRNA干扰序列,构建pSilencer干扰载体,转染成纤维细胞,采用RT-PCR进行筛选;构建慢病毒干扰载体,包装病毒,感染成纤维细胞,采用流式细胞技术分选阳性细胞,阳性细胞予以测序鉴定并检测沉默效果。结果,获得Myostatin基因沉默效率约90%的RNA干扰片段PSL1,包装病毒获得滴度为1×108的病毒颗粒,流式细胞技术分选得到纯度达99%的Myostatin基因沉默成纤维细胞系。采用慢病毒感染接合流式细胞术分选,能较快获得无抗性标记的转基因阳性细胞系,为培育Myostatin基因沉默的转基因羊及探索Myostatin的调控机理奠定基础。

主 题 词：肌肉生长抑制素 RNA干扰 慢病毒 绵羊成纤维细胞 

学科分类：0905[农学-林学类] 08[工学] 09[农学] 0836[0836] 090501[090501] 

核心收录：

馆 藏 号：203780375...