硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因真核表达载体的构建及表达

作     者：于峰祥 于建宁 王公金 潘伟芹 徐小波 徐志伟 花卫华 刘泉 YU Feng-xiang;YU Jian-ning;WANG Gong-jin;PAN Wei-qin;XU Xiao-bo;XU Zhi-wei;HUA Wei-hua;LIU Quan

作者机构：南京师范大学医学分子生物学重点实验室江苏南京210097 江苏省农业科学院畜牧研究所江苏南京210014 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所江苏句容212400 

基　　金：农业部转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08006-004) 江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(10)421] 

出 版 物：《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2011年第27卷第5期

页      码：1043-1046页

摘      要：探讨SQR基因真核表达载体pcDNA3.1(-)-SQR-Myc的构建及其在真核细胞中的表达。根据已知荚膜红杆菌SQR基因序列设计5 端和3 端引物,采用PCR方法获得SQR基因,通过pMD-18T载体构建得到中间质粒pMD-18T-SQR-Myc;采用限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ双酶切该中间质粒,将SQR基因插入真核表达载体pcD-NA3.1(-)相应酶切位点,获得重组质粒pcDNA3.1(-)-SQR-Myc;采用脂质体法瞬时转染HEK293细胞并进行West-ern blot蛋白鉴定。结果显示:该研究已成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-SQR-Myc,质粒测序及酶切结果完全正确,并且SQR能够在HEK293细胞系中正常表达。

主 题 词：硫化物醌氧化还原酶 重组质粒 真核表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-4440.2011.05.023

馆 藏 号：203780382...