甲基营养菌MP688中启动子探针载体的构建

作     者：杜宝华 葛欣 王文溪 熊向华 汪建华 何建勇 张惟材 

作者机构：军事医学科学院生物工程研究所北京100071 沈阳药科大学辽宁沈阳110016 

基　　金：国家科技支撑计划(2007BAI46B01) 国家高技术研究发展计划(2006AA020303) 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2012年第23卷第5期

页      码：644-647页

摘      要：目的:以半乳糖苷酶基因作为报告基因,构建适于探测甲基营养菌MP688启动子的载体。方法:通过PCR扩增半乳糖苷酶基因片段,连入质粒pCM66构建启动子活性探针载体pMPlacZ。根据MP688的基因组序列设计引物,通过PCR扩增5个pqqA基因、核糖体亚基A基因(rpsA)、核糖体亚基B基因(rpsB)、伴侣分子groel基因和甲醇脱氢酶基因(mdh)等共9个基因的启动子序列,将这9个启动子片段连入pMPlacZ进行活性测定。结果:构建了一个适于探测甲基营养菌MP688的启动子活性的载体pMPlacZ;利用构建的报告系统对MP688中9个基因的启动子进行了活性比较,得到3个与吡咯喹啉醌合成相关的强启动子。结论:构建的启动子活性检测载体可以有效、灵敏地用于MP688强启动子的筛选和启动子活性检测。

主 题 词：甲基营养菌 半乳糖苷酶 启动子活性检测载体 启动子活性测定 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2012.05.006

馆 藏 号：203780928...