基于响应面设计的百日咳粘附素浸提工艺优化

作     者：张飞伟 赵祥宇 蔡峰 周晓舟 刘晓凤 秦敏 

作者机构：成都生物制品研究所有限责任公司成都610023 

基　　金：重大新药创制专项(2013ZX09402-302-007)资助~~ 

出 版 物：《应用与环境生物学报》 (Chinese Journal of Applied and Environmental Biology)

年 卷 期：2013年第19卷第6期

页      码：1064-1068页

摘      要：百日咳粘附素(PRN)是无细胞百日咳疫苗的重要保护性抗原之一,优化其浸提工艺对提高PRN产量、纯度乃至百日咳疫苗的质量都具有重要意义.通过中心复合表面设计(CCF)响应面模型和ELISA定量分析相结合的方法研究了影响PRN浸提工艺的关键因素.经两轮CCF响应面优化,确定了PRN浸提的最优工艺参数:温度60℃,菌浓度50 mg/mL,时间90 min,p H 8.5,NaCl 0.15 mol/L;通过Monte Carlo模拟和Plackett Burman模型设计预测和验证了工艺稳健性参数范围:温度58-62℃,菌浓度40-60 mg/mL,时间80-100 min,pH 8.45-8.55,NaCl 0.12-0.18 mol/L.响应面优化后,粗提液PRN产量提高了50%.研究表明,温度对PRN浸提影响最大,其次是pH;菌浓度、时间及NaCl含量的影响相对较小,但与温度、pH有交互作用.

主 题 词：百日咳 百日咳粘附素 响应面 浸提 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 0830[工学-生物工程类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/SP.J.1145.2013.01064

馆 藏 号：203781444...