微小RNA-206过表达慢病毒载体构建及其对MCF-7乳腺癌细胞生物学特性的影响

作     者：明佳 杜俊泽 王寅欢 姜军 Ming Jia;Du Junze;Wang Yinhuan;Jiang Jun

作者机构：重庆医科大学附属第二医院三腺外科400010 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81172539) 重庆市自然科学基金资助项目(CSTC2011jjA10044) 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2014年第31卷第11期

页      码：2408-2410页

摘      要：目的 构建微小RNA-206（miR-206）的慢病毒载体转染MCF-7细胞,观察转染效率和细胞生物学特性的改变.方法 针对miR-206有效的靶序列设计合成寡链DNA,经过退火、连接、聚合酶链反应（PCR）筛选、测序鉴定、慢病毒包装、共转染等步骤获得慢病毒LV-hsa-miR-206,将其转染MCF-7细胞,实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-206表达,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期.结果 PCR扩增出插入片段,目的基因的测序结果与GeneBank序列一致.感染慢病毒后,MCF-7的miR-206表达由1.000增加至120.331±1.801;细胞增殖能力显著降低,在转染后第2天由1.420±0.052降低为1.275±0.147,第3天由1.762±0.089降低为1.387±0.093,第4天由2.045±0.235降低为1.269±0.103,凋亡细胞和G2期细胞比例显著增加.结论 成功构建LV-hsa-miR-206慢病毒载体,并在MCF-7细胞中成功表达,miR-206表达水平增加导致细胞的生物学特性发生明显变化.

主 题 词：微小RNA-206 重组慢病毒载体 乳腺癌 转移 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2014.11.015

馆 藏 号：203781984...