猪IL-17A荧光定量PCR检测方法的建立及其在PCV2感染检测中的应用

作     者：赵晶 柳亚茹 王金良 董林 沈志强 朱瑞良 ZHAO Jing;LIU Yarn;WANG Jinliang;DONG Lin;SHEN Zhiqiang;ZHU Ruiliang

作者机构：山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东农业大学动物科技学院山东泰安271000 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 

基　　金：山东省泰山产业领军人才工程高效生态农业创新类资助项目(LJNY2015014) 山东省自然科学基金资助项目(ZR2017MC056) 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第51卷第10期

页      码：87-91页

摘      要：根据GenBank中猪白介素17A(interleukin-17A,IL-17A)的基因序列,设计特异性引物,构建阳性重组质粒,并以重组质粒为模板,建立定量检测猪IL-17A的荧光染料(SYBR GreenⅠ)实时PCR(RT-PCR)检测方法。结果显示:PCR扩增片段大小242 bp,与GenBank已知基因序列同源性100%;建立的RT-PCR检测方法在10~1~10~6拷贝/μL时,标准模板的Ct值与浓度之间有较好的线性关系,扩增曲线呈"S"型,R^2≥0.997 7;熔解曲线分析表明,产物为特异性单峰且重复性较好;仔猪外周血中IL-17A mRNA转录定量检测发现,人工感染猪圆环病毒2型(PCV2)猪外周血中IL-17A mRNA的表达量明显升高,且在第7天达到高峰值。本研究为IL-17A基因转录的定量检测提供了技术支持,同时验证了IL-17A可作为检测PCV2感染的新型标志物。

主 题 词：猪白介素17A 实时PCR 猪圆环病毒2型 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203782502...