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交叉引物恒温扩增技术检测创伤弧菌的应用研究

交叉引物恒温扩增技术检测创伤弧菌的应用研究

作     者:张晶 吴新伟 陈惠玲 陈佳璇 狄飚 白志军 ZHANG Jing;WU Xin-wei;CHEN Hui-ling;CHEN Jia-xuan;DI Biao;BAI Zhi-jun

作者机构:广州市疾病预防控制中心 

基  金:广州市医药卫生科技项目(No.20171A011274) 广东省科技计划项目(No.2016A020215217) 广州市科技计划项目(No.201707010130) 广州市医学重点学科建设项目(No.2017-2019-07)联合资助 

出 版 物:《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期:2019年第35卷第8期

页      码:711-714页

摘      要:目的建立一种快速检测创伤弧菌( Vibrio vulnificus )的交叉引物恒温扩增(cross priming amplification,CPA)技术。方法 针对创伤弧菌vvhA基因序列保守区域设计CPA引物和探针,并优化反应体系和反应条件,同时验证方法的灵敏度和特异性。结果 对创伤弧菌的检测具有高度特异性;对创伤弧菌菌液检测的灵敏度达到了1.28×10^3 CFU /mL,此法 40~60 min 内即可完成检测。利用CPA法针对本实验室前期研究的CB型、EA型、CAB型、CA型和EB型等亚型创伤弧菌毒株计算特异性和敏感性,5种亚型中除了CB亚型特异性和敏感性为95.65%和100%,其余亚型特异性和敏感性均为100%。结论 本研究建立的CPA法具有较高的特异性和灵敏性,可有效缩短检验时间提高检验效率。

主 题 词:创伤弧菌 交叉引物恒温扩增 vvhA基因 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1002-2694.2019.00.132

馆 藏 号:203785008...

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