产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因的克隆与原核表达

作     者：宋占科 王小艳 陈国强 李春 SONG Zhanke;WANG Xiaoyan;CHEN Guoqiang;LI Chun

作者机构：北京理工大学生命科学与技术学院北京100081 石河子大学化学化工学院新疆石河子832003 

基　　金：国家自然科学基金项目(20776017) 北京市自然科学基金项目(5072028) 北京理工大学基础研究基金项目(20060642004) 

出 版 物：《化工学报》 (CIESC Journal)

年 卷 期：2008年第59卷第12期

页      码：3101-3106页

摘      要：产紫青霉(Penicillium purpurogenum Li-3)β-葡萄糖醛酸苷酶可定向转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸。根据β-葡萄糖醛酸苷酶氨基酸序列的同源保守区设计简并引物,PCR扩增克隆得到β-葡萄糖醛酸苷酶编码基因pgus(GenBank登录号:EU095019),该基因全长1815bp,编码604个氨基酸,理论单亚基分子量为67.77×103,含有4个潜在的N-糖基化位点。构建原核表达载体pET-28a(+)-pgus,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达pgus基因的重组菌。经IPTG诱导表达、Ni2+-NTA亲和层析柱纯化的重组酶PGUS-E,纯度达到95%以上,得率为25.6mg·L-1,SDS-PAGE分析检测分子量约为70×103,比酶活达到6368U·mg-1。

主 题 词：甘草酸 β-葡萄糖醛酸苷酶 克隆 产紫青霉 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 081703[081703] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0438-1157.2008.12.022

馆 藏 号：203786988...