耐万古霉素肠球菌检测基因芯片方法的建立和验证

作     者：何莎 宋燚 陈苏红 王升启 张五星 周伟 刘琪琦 HE Sha;SONG Yi;CHEN Su-hong;WANG Sheng-qi;ZHANG Wu-xing;ZHOU Wei;LIU Qi-qi

作者机构：河北北方学院研究生部河北张家口075000 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 解放军309医院北京100091 

基　　金："艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项资助项目(2013ZX10004802-008) 

出 版 物：《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期：2015年第39卷第7期

页      码：514-518页

摘      要：目的基于基因芯片技术建立一种能快速甄别粪肠球菌、屎肠球菌及万古霉素耐药基因的检测方法。方法根据Gen Bank中查找的2种常见肠球菌特异性基因序列(ddl)及万古霉素耐药基因(van A,van B)序列,设计与合成用于检测肠球菌的特异性基因及耐药基因的引物和探针,制备耐万古霉素肠球菌(VRE)检测基因芯片。利用多重不对称PCR法扩增样品中的特异性基因与耐药基因片段,标记产物与基因芯片上的探针杂交,经清洗、化学发光法显色后进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交反应和化学发光法检测条件下,评价芯片的特异性、灵敏性和重复性。结果共筛选出1对通用引物、4对特异性引物和1条细菌通用探针、4条特异性检测探针。该芯片具有良好的特异性和重复性,灵敏性可达103CFU/ml。10例临床分离株样本的芯片检测结果与药敏实验基本一致(8/10)。结论初步建立了检测VRE的基因芯片方法,利用此方法可以甄别2种VRE种类并检测其耐药基因。

主 题 词：万古霉素 肠球菌,粪 万古霉素抗药性 芯片分析技术 耐万古霉素肠球菌 多重PCR 化学发光法 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.7644/j.issn.1674-9960.2015.07.006

馆 藏 号：203787322...