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猪繁殖与呼吸综合征病毒orf7和orf5双基因的原核表达研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒orf7和orf5双基因的原核表达研究

作     者:乐敏 邱德新 陈焕春 蒋增海 

作者机构:华中农业大学动物医学院动物病毒室湖北武汉430070 

基  金:湖北省"十五"科技攻关资助项目(2001AA202A04) 华中农业大学大学生科技创新基金重点资助项目(2003A052) 

出 版 物:《中国病毒学》 (Virologica Sinica)

年 卷 期:2004年第19卷第5期

页      码:476-480页

摘      要:根据PRRSV已知序列设计两对引物,采用RT-PCR方法分别扩增orf7和orf5基因片段。利用EcoRI、SpeI和HindⅢ位点将orf7和orf5基因片段依次克隆到pMD-18T载体,构建成重组质粒pMD18NE,并比较所克隆基因序列的同源性。将串联的orf7和orf5基因亚克隆到原核表达载体pGEX-KG,构建重组原核融合表达质粒pGEX-KGNE,并转化BL21,SDS-PAGE和Western-blot分析表明:orf7和orf5基因与GST获得了融合表达,并且表达的融合蛋白GST-NE具有免疫学反应活性,这为猪繁殖与呼吸综合征血清学诊断方法的建立及疫苗研究打下基础。

主 题 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 orf7 orf5 双基因原核表达 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

馆 藏 号:203788931...

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