TFF1基因启动子双荧光素酶报告基因载体的构建及活性鉴定

作     者：李俊龙 刘小康 王祎 Li Jun-long;Liu Xiao-kang;Wang-Yi

作者机构：第三军医大第一附属医院西南医院研究中心重庆404100 四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041 

出 版 物：《四川生理科学杂志》 (Sichuan Journal of Physiological Sciences)

年 卷 期：2019年第41卷第3期

页      码：186-189页

摘      要：目的:构建含有野生型或突变型人三叶因子1(Trefoil factor1,TFF1)基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒,并研究雌激素对上述启动子转录活性的影响。方法:设计人野生型和突变型TFF1基因启动子的引物,扩增回收片段,将其克隆到含有荧光素酶报告基因的载体pGL3-Basic中构建重组质粒,经双酶切和测序鉴定后转染胆囊癌GBC-SD细胞,24 h后采用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶的表达活性。结果:成功构建了野生型pGL3-TFF1质粒和雌激素应答元件(Estrogen response elements,ERE)位点突变的pGL3-TFF1-ERE突变质粒,激活蛋白1(Activating protein-1,AP-1)位点突变的pGL3-TFF1-AP-1突变质粒以及pGL3-TFF1-ERE+AP-1双突变质粒。经双荧光素酶报告基因检测分析,pGL3-TFF1质粒和pGL3-TFF1-ERE突变质粒均具有基础转录活性,与对照组比较(P0.05)。结论:本研究成功构建了野生型以及突变型TFF1启动子质粒,发现非经典雌激素受体结合部位——激活蛋白1(AP-1)位点对雌激素诱导的TFF1启动子转录活性增强发挥决定性作用。

主 题 词：抑癌基因 TFF1 启动子质粒 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号：203791221...