B族黄曲霉毒素抗原合成设计及特异性、广谱性抗体制备与特性分析

作     者：张海棠 王晓斐 职爱民 王亚楠 王自良 ZHANG Haitang;WANG Xiaofei;ZHI Aimin;WANG Yanan;WANG Ziliang

作者机构：河南科技学院动物科技学院河南新乡453003 河南旭瑞食品有限公司河南焦作454150 

基　　金：“十二五”国家科技支撑计划项目(2014BAD13B05) 河南省产学研项目(162107000056) 

出 版 物：《核农学报》 (Journal of Nuclear Agricultural Sciences)

年 卷 期：2019年第33卷第12期

页      码：2414-2420页

摘      要：为制备B族黄曲霉毒素(BGAFs)特异性强、广谱性好的抗体,本研究根据黄曲霉毒素B1(AFB1)的分子结构和活性位点,采用肟化活泼酯法(OAE)、氨甲基化法(MOA)、混合酸酐法(MA)、半缩醛法(SA)、环氧化物法(EP)和烯醇醚衍生物法(EED)6种方法合成BGAFs人工抗原AFB1-BSA,并通过UV和SDS-PAGE进行鉴定;采用AFB1-BSA免疫新西兰白兔制备多克隆抗体(AFB1 pAb),间接ELISA检测AFB1 pAb效价,间接竞争ELISA(icELISA)分析其敏感性,交叉反应试验(CR)分析其特异性和广谱性。结果表明,AFB1-BSA合成成功,在BGAFs抗原合成的6种方法中OAE效果最好,AFB1与BSA的分子结合比为8.46∶1;AFB1 pAb的间接ELISA效价为1∶(1.28×104),IC50为10.32μg·L-1,与AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2的CR分别为75.21%、44.13%、14.72%、16.36%、1.44%。本研究制备出了高效价、敏感、特异、广谱的AFB1 pAb,为BGAFs免疫检测方法的建立奠定了物质和技术基础。

主 题 词：B族黄曲霉毒素 抗原合成设计 多克隆抗体 特性分析 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

核心收录：

D　O　I：10.11869/j.issn.100-8551.2019.12.2414

馆 藏 号：203791757...