弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体构建及在Vero细胞中的表达

作     者：龙彩虹 吴少庭 翁亚彪 高世同 张仁利 林绮萍 谢德华 卜春玲 雷明军 黄达娜 

作者机构：华南农业大学兽医学院 深圳市卫生防疫站分子生物室广东深圳518020 华中科技大学同济医学院 

出 版 物：《中国寄生虫病防治杂志》 (Chinese Journal of Parasitic Disease Control)

年 卷 期：2004年第17卷第6期

页      码：331-334页

摘      要：目的　构建弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体 ,并在Vero细胞中表达。　方法　设计 1对引物 ,从弓形虫RH株速殖子基因组DNA中扩增SAG2全长编码基因 ,构建 pVAX1 SAG2真核表达重组质粒。以限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ进行双酶切、PCR鉴定 ,纯化后进行测序鉴定。脂质体介导法瞬时转染Vero细胞 ,同时以 pVAX1为对照 ,48h后收集细胞 ,Western blot鉴定。　结果　从弓形虫RH株DNA中扩增出了 5 77bp的SAG2基因 ,构建了真核表达载体 pVAX1 SAG2 ,在质脂体介导下转染Vero细胞 ,质粒DNA成功的转染到细胞中。通过Westen blot分析 ,细胞裂解液样品有 1条可被弓形虫免疫血清所识别的约 17ku大小的条带 ,与预计大小一致。　结论　真核表达载体pVAX1 SAG2在Vero细胞中有一定表达 ,且有一定的活性。

主 题 词：弓形虫 SAG21基因克隆 表达 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-5234.2004.06.004

馆 藏 号：203793167...