检测猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR方法的建立

作     者：刘俊平 庄金山 孙志 张建武 陶琦 袁世山 LIU Jun-ping;ZHUANG Jin-shan;SUN Zhi;ZHANG Jian-wu;TAO Qi;YUAN Shi-shan

作者机构：上海出入境检验检疫局上海200135 中国农业科学院上海兽医研究所上海200232 

基　　金：上海市科委基金资助项目(05DZ0511) 

出 版 物：《上海交通大学学报（农业科学版）》 (Journal of Shanghai Jiaotong University(Agricultural Science))

年 卷 期：2007年第25卷第5期

页      码：483-488页

摘      要：针对猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2的序列设计两对特异性引物及TaqMan探针,以感PCV2的PK-15细胞培养上清的DNA提取物为模板,分别扩增499 bp和131 bp的片段,建立了检测PCV2的TaqMan荧光PCR方法。结果表明:TaqMan荧光PCR检测PCV2的最佳探针浓度为0.5 pmol·μL-1;TaqMan荧光PCR两步法操作快捷,扩增131 bp的引物PCF1101/PCR1232检测敏感性高(3.17×102拷贝·μL-1),重复性好。在诸多检测样品中,除检测到PCV2检测指标出现阳性外,猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV),日本乙型脑炎病毒(JEV),猪伪狂犬病毒(PRV),猪瘟病毒(CSFV)及PK-15细胞等检测指标均为阴性,表明特异性强;与普通PCR的检测结果(2/10)比较,本法的敏感性和对临床样品的阳性检出率(3/10)更高。上述研究表明,本方法快速、敏感、特异,具有很高的重复性,且可实时监测,能有效检测PCV2。

主 题 词：猪圆环病毒2型 TaqMaN 荧光PCR 检测 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-9964.2007.05.013

馆 藏 号：203794091...