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采用正交设计方法优化梨ISSR-PCR反应体系

采用正交设计方法优化梨ISSR-PCR反应体系

作     者:曾艳玲 谭晓风 曾晓峰 ZENG Yan-ling;TAN Xiao-feng;ZENG Xiao-feng

作者机构:中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 

基  金:湖南省科技三项基金(No.00JZYZ115) 中南林业科技大学青年科学基金项目(No.0700913) 

出 版 物:《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期:2008年第47卷第11期

页      码:1235-1238页

摘      要:采用正交设计的方法对梨ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq DNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用DPS数据处理软件分析,建立的梨ISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:Taq DNA聚合酶1.0U、Mg2+的浓度2.0 mmol·L-1、模板DNA 10~80 ng、dNTPs 0.10 mmol·L-1、引物0.3μmol·L-1。对梨ISSR-PCR最佳反应体系进行了梯度退火试验,得到的最佳退火温度为55℃。

主 题 词: 正交设计 ISSR—PCR 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 09[农学] 

D O I:10.3969/j.issn.0439-8114.2008.11.005

馆 藏 号:203794430...

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